产品简介 

在细胞体外培养工作中，为了达到长期保存细胞的生物活性的目的，须将细胞进行冷冻保存，并在实验需要的时候将其重新复苏和培养。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用添加适量保护剂使细胞缓慢降温至指定温度范围，从而到达保护细胞的目的。

使用说明

(一)细胞冻存

1、选择对数生长期的细胞（90%左右），并保证在冻存前24 h内换液一次，收集细胞，并将细胞制备成单细胞悬液（贴壁细胞可能需要用胰酶消化），计数；

2、将细胞悬液1000 r/min 离心5 min，弃上清；

3、向细胞沉淀物中加入细胞冻存液，轻轻吹打，重悬细胞，使细胞密度达到5×10⁵-1×10⁷个/mL；

4、将上述细胞悬液按0.5mL-1.0mL的量，分装于无菌细胞冻存管内，拧紧管盖，并做好标记；

5、直接将分装好的细胞冻存管直接置于-80℃超低温冰箱中，可长期冷冻保存。

6、如果想液氮中长期保存，需先放入-80℃超低温冰箱至少一天时间，方可移至液氮罐中保存。

(二)细胞复苏

1、从液氮罐中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴锅中快速解冻(操作时切勿使水浸没冻存管口，以免造成细胞污染)；

2、待细胞冻存管中冻存液完全融化后，立即逐滴加入少量细胞完全培养基于该冷冻管中与细胞进行混合，再将细胞混合液从冻存管中移入含有8-10 mL该细胞完全培养基的试管中，轻轻混合均匀；1000 r/min离心5 min，弃上清；

3、加入1-2 mL完全培养基重悬细胞，按照合适的接种密度将细胞接种到细胞培养容器中，加入适量的已预热的新鲜的细胞完全培养基；

4、轻轻摇晃培养器皿，使细胞分布均匀，静置于37℃、饱和湿度细胞培养箱中培养。

产品稳定性及保存条件

1、置于2-8℃避光保存，有效期为1年；

2、本产品请于保质期内使用，超过保质期，必须放弃使用；

3、为确保产品质量，请避免反复冻融相关产品。

注意事项

1、冻存细胞分装至冻存管后，应减少在室温/4℃存放时间，尽快移入到-80℃超低温冰箱；

2、对于原代胚胎干细胞/iPS细胞/其它珍贵细胞样本等冻存时，我们建议您在使用前，事先对所冻存的细胞进行至少为期1周的细胞冻存测试实验，确认没问题后再进行正式冻存；

3、本产品经3次0.22 μm过滤除菌，使用本产品时应注意无菌操作，避免污染；

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；

5、本产品仅用于科研用途，不可用于诊断、治疗、临床及其他用途。